Efecto de mutaciones génicas en la virulencia de Aeromonas salmonicida y evaluación de su uso como vacuna viva en trucha arcoiris Oncorhynchus mykiss (Walbaum, 1792) / [recurso electrónico]
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Universidad Católica del Norte,
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Prof. guía: Javier Santander M.
Prof. guía: Claudio Miranda Pérez.
"Sin Formulario de Autorización".
"No disponible en Red de la Universidad Católica del Norte, para su consulta solicitar en colección Tesis".
Programa cooperativo de Doctorado en Acuicultura: Universidad de Chile, Universidad Católica del Norte, Pontificia Universidad Católica de Valparaíso.
Bibliografía p: 67-85.
1. Introducción. -- 1.1. Vacunas atenuadas para peces. -- 1.2. Proteínas reguladoras globales PhoQ/PhoP y Crp. -- 1.3. Aeromonas salmonicida: enfermedad y vacunas. -- 1.4. Planteamiento del problema. -- 2. Hipótesis. -- 3. Objetivos. -- 4. Materiales y métodos. -- 4.1. Cepas bacterianas, plásmidos y condiciones de cultivo. --4.2. Análisis genómico de la cepa parental de aeromonas salmonicida (J223). -- 4.3. Construcción de mutantes. -- 4.4. Preparación de células electrocompetentes y electroporación. -- 4.5. Curva de crecimiento. -- 4.6. Perfil de lipopolisacáridos. -- 4.7. Perfil de proteínas de membrana externa. -- 4.8. Presencia de capa A. -- 4.9. Síntesis de melanina. -- 4.10. Expresión de Crp. -- 4.11. Utilización de carbohidratos. -- 4.12. Evaluación de la resistencia a la polimixina B. -- 4.13. Cultivo celular y ensayos in vitro. -- 4.14. Ensayos de adhesión/infección. -- 4.15. Ensayos in vivo en trucha arcoíris (O. mykiss). -- 4.16. Evaluación de la virulencia de A. salmonicida. -- 4.17. Inmunización y desafío en trucha arcoíris. -- 4.18. Programa de análisis estadístico. -- 5. Resultados. -- 5.1. Objetivo específico Nº1. Analizar el efecto de la deleción de los genes phoP y/o crp en la fisiología bacteriana de Aeromonas salmonicida. -- 5.2. Objetivo específico N°2. Analizar la capacidad de colonización e invasión de las cepas atenuadas de A. salmonicida in vitro en células de peces.
5.3. Objetivo específico N°3. Calcular la dosis letal media (DL50) de la cepa mutante A. salmonicida Δcrp en trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss). -- 5.4. Objetivo específico N°4. Estimar la protección inmune otorgada por la cepa atenuada A. salmonicida Δcrp en trucha arcoíris desafiada con la cepa silvestre virulenta. -- 6. Discusión. -- 6.1. Factores de virulencia presentes en aeromonas salmonicida J223. -- 6.2. Relación filogenética de aeromonas salmonicida J223. -- 6.3. Fenotipo de las cepas mutantes y relación con virulencia. -- 6.4. Virulencia in vivo y protección inmune de A. salmonicida en trucha arcoíris. -- 7. Conclusiones.
Tesis electrónica (pdf y/o cd).
Doctorado.
Prof. guía: Claudio Miranda Pérez.
"Sin Formulario de Autorización".
"No disponible en Red de la Universidad Católica del Norte, para su consulta solicitar en colección Tesis".
Programa cooperativo de Doctorado en Acuicultura: Universidad de Chile, Universidad Católica del Norte, Pontificia Universidad Católica de Valparaíso.
Bibliografía p: 67-85.
1. Introducción. -- 1.1. Vacunas atenuadas para peces. -- 1.2. Proteínas reguladoras globales PhoQ/PhoP y Crp. -- 1.3. Aeromonas salmonicida: enfermedad y vacunas. -- 1.4. Planteamiento del problema. -- 2. Hipótesis. -- 3. Objetivos. -- 4. Materiales y métodos. -- 4.1. Cepas bacterianas, plásmidos y condiciones de cultivo. --4.2. Análisis genómico de la cepa parental de aeromonas salmonicida (J223). -- 4.3. Construcción de mutantes. -- 4.4. Preparación de células electrocompetentes y electroporación. -- 4.5. Curva de crecimiento. -- 4.6. Perfil de lipopolisacáridos. -- 4.7. Perfil de proteínas de membrana externa. -- 4.8. Presencia de capa A. -- 4.9. Síntesis de melanina. -- 4.10. Expresión de Crp. -- 4.11. Utilización de carbohidratos. -- 4.12. Evaluación de la resistencia a la polimixina B. -- 4.13. Cultivo celular y ensayos in vitro. -- 4.14. Ensayos de adhesión/infección. -- 4.15. Ensayos in vivo en trucha arcoíris (O. mykiss). -- 4.16. Evaluación de la virulencia de A. salmonicida. -- 4.17. Inmunización y desafío en trucha arcoíris. -- 4.18. Programa de análisis estadístico. -- 5. Resultados. -- 5.1. Objetivo específico Nº1. Analizar el efecto de la deleción de los genes phoP y/o crp en la fisiología bacteriana de Aeromonas salmonicida. -- 5.2. Objetivo específico N°2. Analizar la capacidad de colonización e invasión de las cepas atenuadas de A. salmonicida in vitro en células de peces.
5.3. Objetivo específico N°3. Calcular la dosis letal media (DL50) de la cepa mutante A. salmonicida Δcrp en trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss). -- 5.4. Objetivo específico N°4. Estimar la protección inmune otorgada por la cepa atenuada A. salmonicida Δcrp en trucha arcoíris desafiada con la cepa silvestre virulenta. -- 6. Discusión. -- 6.1. Factores de virulencia presentes en aeromonas salmonicida J223. -- 6.2. Relación filogenética de aeromonas salmonicida J223. -- 6.3. Fenotipo de las cepas mutantes y relación con virulencia. -- 6.4. Virulencia in vivo y protección inmune de A. salmonicida en trucha arcoíris. -- 7. Conclusiones.
Tesis electrónica (pdf y/o cd).
Doctorado.